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大鼠血管緊張素1-7(ANG1-7)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
大鼠血管緊張素1-7(ANG1-7)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理主要基于?競爭法?或?夾心法?,具體如下:
BS-3489大鼠血管緊張素1-7(ANG1-7)ELISA試劑盒
1. ?競爭法?
部分試劑盒采用競爭性原理,其核心步驟包括:
標(biāo)準(zhǔn)品與樣本競爭結(jié)合?:待測樣本中的ANG1-7與生物素標(biāo)記的抗體競爭結(jié)合預(yù)包被在酶標(biāo)板上的抗體。
信號檢測?:加入酶標(biāo)二抗(如HRP標(biāo)記的親和素)后,通過顯色反應(yīng)(TMB底物)測定吸光度(OD值),ANG1-7濃度與OD值呈負(fù)相關(guān),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度?。
2. ?夾心法?
部分試劑盒采用雙抗體夾心法,流程包括:
捕獲抗體包被?:酶標(biāo)板預(yù)包被抗ANG1-7抗體,捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白。
檢測抗體結(jié)合?:加入生物素標(biāo)記的檢測抗體,形成“抗體-抗原-抗體"復(fù)合物。
信號放大?:通過鏈霉親和素-HRP復(fù)合物催化顯色,OD值與ANG1-7濃度正相關(guān)?。
關(guān)鍵試劑與操作
標(biāo)準(zhǔn)品?:需梯度稀釋以繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
洗滌液?:通常為20倍濃縮液,需稀釋后使用。
樣本處理?:血清/血漿需避免溶血,組織勻漿需離心澄清?。
注意事項(xiàng)
樣本保存?:短期(2-8℃)或長期(-20℃/-80℃)保存需避免反復(fù)凍融。
干擾因素?:NaN3會HRP活性,需避免使用含NaN3的樣本?。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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