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大鼠血管緊張素1型受體(AT1)ELISA試劑盒實驗原理
大鼠AT1受體ELISA試劑盒基于?雙抗體夾心法?(Sandwich ELISA)原理,通過特異性抗體捕獲目標(biāo)蛋白并定量檢測其濃度?。
1. ?核心步驟?
包被抗體固定?:微孔板預(yù)包被抗大鼠AT1受體的單克隆抗體,形成固相捕獲層?。
抗原-抗體結(jié)合?:樣本(如大鼠血清、組織勻漿)中的AT1受體與包被抗體結(jié)合,形成“抗體-抗原"復(fù)合物?。
酶標(biāo)二抗反應(yīng)?:加入生物素標(biāo)記的二抗(如抗AT1受體多抗),與抗原結(jié)合后形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物?。
顯色檢測?:加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素(SABC)和底物(TMB),酶催化反應(yīng)
生成藍色產(chǎn)物,終止后變黃色,450nm測吸光度(OD值)?。
2. ?定量分析?
標(biāo)準(zhǔn)曲線法:通過已知濃度的AT1受體標(biāo)準(zhǔn)品建立OD值與濃度的線性關(guān)系,樣本濃度通過曲線擬合計算?。
靈敏度與范圍:典型檢測范圍為3.12-200 ng/mL,適用于大鼠樣本中AT1受體的高靈敏度檢測?。
3. ?技術(shù)特點?
特異性?:抗體對AT1受體具有高親和力,避免與其他血管緊張素受體(如AT2)交叉反應(yīng)?。
信號放大?:生物素-親和素系統(tǒng)增強信號,提高檢測靈敏度?。
4. ?應(yīng)用場景?
心血管研究?:分析AT1受體在高血壓、心肌肥厚等疾病模型中的表達變化?。
藥物篩選?:評估AT1受體拮抗劑的藥效?。
5. ?注意事項?
樣本處理?:避免反復(fù)凍融,血清/血漿需離心去除顆粒物?。
干擾因素?:高脂或溶血樣本可能影響結(jié)果,需預(yù)處理?。
注:以上僅供參考,科研使用,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
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